Uk-dom.ru

Что такое протозойные инфекции – возбудители и методы диагностики, лечение и профилактика

Основные методы лабораторной диагностики протозойных инфекций

Микроскопический метод направлен на выявление па­разитов в нативных и окрашенных препаратах. Материалом для исследования служат кровь, пунктаты грудины или лимфатических узлов, спинномозговая жидкость, соскоб с кожных элементов, фекалии, дуоденальное содержимое, отделяемое слизис­той оболочки наружных половых органов или мочеиспускательного канала. Простейшие можно обнару­жить как в мазках, так и в гистологических препаратах, изготовленных из поражен­ных тканей. Разработано значительное число методов окраски простейших, среди которых наиболее часто применяется метод Романовского-Гимза.

Культуральный метод заключается в посеве исследуемого материала на среды, содержащие кровь или нативную сыворотку, яичный белок, углево­ды, аминокислоты и другие вещества(рН сред 7,0-7,6). Культивирование большинства простейших осуществляют обычно при 37 0 С, лейшманий и трипаносомпри 20-26 0 С. Результаты посевов учитывают визуально и микроскопическим методом ( препарат «раздавленная» капля) через 24, 48, 72, 120 часов. Дизентерийные амебы, балантидии, трихомонады, хиломастиксы проще выявить микроскопическими методами, однако при необходимости применяют культуральное исследование.

Серологический метод при протозойных инфекциях имеет вспомогательное значение. Применяется РА (американский трипаносомоз), РП (американский трипаносомоз, амебиаз), РСК (американский трипаносомоз, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РИФ (американский трипаносомоз, малярия, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РНГА (ток­соплазмоз), ИФА (токсоплазмоз, тропическая малярия, амебиаз, кожный и висцеральный лейшманиозы, американский трипано­сомоз).

Аллергический метод – кожные аллергические пробы применяются редко, обычно для под­тверждения диагноза кожного лейшманиоза (проба с лейшманином, реакция Монтенегро) и токсоплазмоза (проба с токсоплазмином).

Биологический метод (биопроба) применяется для подтверждения диагноза ряда протозоо­зов, а также в научных целях. Чувствительными животными для дизентерийных амеб и балантидий являются 2-3-недельные крысята, морские свинки, котята, щен­ки, золотистые хомячки; для лямблий — мыши; для лейшманий белые мыши и хомяки; для американских трипаносом – морские свинки; для африканских трипаносом – мартышки; для токсоплазм – белые мыши. Заражение животных осуществляют па­рентерально, в слепую кишку при лапаротомии, через длинный пластмассовый зонд или путем скармливания животным исследуемого материала.

В течение 30 дней после заражения микроскопическому исследованию подвергают кровь животных, мазки-отпечатки из органов или гистологические препараты из пора­женных тканей.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРОТОЗОЙНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Малярия

Возбудителями тропической малярии является Plasmodium falciparum, трехдневной малярии Plasmodium vivax, четырехдневной ма­лярии – Plasmodium malariae и трехдневной или овале-малярии Plasmodium ovale. Малярийные плазмодии претерпевают половой цикл развития в организме комара рода Anopheles и бесполый цикл (шизогония – рис.41) — в орга­низме человека, поражая сначала клетки печени (тканевая шизогония), а затем эритроциты (эритроцитарная шизогония).

Микроскопический метод. Кровь на наличие плазмодиев малярии исследу­ют на стадии эритроцитарной шизогонии путем микроскопии обычных мазков и толстой капли, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Плазмодии, ци­топлазма которых окрашена в голубой цвет, а ядро в вишнево-красный, находят в эритроцитах.

Бесполые (эритроцитарные) формы па­разитов имеют некоторые морфологические особенности. В частности, мерозоит представляет собой круглую или овальную форму с небольшим участком цитоплазмы около ядра; кольцевидный трофозоит – одноядерную форма с уз­ким ободком цитоплазмы, окружающим небольшую вакуоль; амебовидный трофозоит – одноядерную форму с различным количеством и величиной псевдоподий; шизонт содержит два или несколько ядер; морула характеризуется полным разделением ядра и цитоплазмы на мерозоиты.

Половые формы плазмодиев (гаметоциты или гамонты) не содержат вакуолей и псевдоподий. Мужские (микрогаметоциты) и женские (макрогаметоциты) формы отличаются по величине и структуре ядра, интенсивности окраски цитоплазмы и размерам.

При микроскопии тонкого мазка при малярии находят обычно кольцевидные трофозоиты. У P. vivax, P. malariae, P. оvale они имеют размеры от 2 до 4 мкм, занимают около 1/3 диаметра эритроцита. Ядра у трофозоитов P. vivax и P. malariae круглые, у P. ovale неправильной формы, крупные; ободок ци­топлазмы ровный, неширокий, суживается к ядру. Молодые кольцевидные трофозоиты P. falclparum мелкие (1,25-1,50 мкм), занимают примерно 1/6 часть диаметра эритроцита, имеют маленькое круглое ядро с тонким ободком цитоплазмы. Взрослые кольцевидные трофозоиты более крупные, занимают 1/3 диаметра эритроцита, ободок цитоплаз­мы толстый, резко суживающийся к ядру.

Амебовидные трофозоиты P. vivax отличаются разнообразием форм, размеров, наличием одной или нескольких псевдоподий, вакуолей, круглого или овального ядра, пигмента в виде темно-коричневых цитоплазматических зерен различной величины и формы. Амебовидные трофозоиты P. malariae округлые и овальные (нередко в виде ленты поперек эритроцита с продолговатым или вытянутым ядром), с короткими и широкими псевдоподиями, более темной цитоп­лазмой и пигментом, ядром непра­вильной формы.. Аме­бовидные трофозоиты P.falciparum в виде круглых или

Рис. 41. Основные стадии эритроцитарной шизогонии малярийных плазмодиев

овальных форм лишены вакуоли, имеют ядро круглой или неправильной формы, пигмент черного цвета, расположенный компактно, однако они, как правило, в периферической крови не обнаруживаются. Мо­лодые трофозоиты P. ovale имеют кольцевидную форму, бо­лее взрослые сходны с P. malariae.

Морула P. vivax содержит обычно от 14 до 16 беспорядочно расположенных мерозоитов, между которыми лежат глыбки пигмента. В моруле P. malariae около 8 крупных мерозоитов, расположенных в виде розетки; в моруле P.falciparum 8-24 мелких мерозоитов, занимающих часть эритроцита; в моруле P. ovale около 8 крупных мерозоитов с ядром неправильной формы. Гаметоциты Р. vivax (крупные), P. malariae (мелкие) и Р. ovale округлой или овальной формы; глыбки пигмента крупные, равномерно расположены в цитоплазме гаметоцитов. В женских гаметоцитах у края цитоплазмы обнаруживают компактное ядро темно-голубого цвета. Расположенное центрально ядро мужских гаметоцитов розовато-фиолетового цвета, крупное, рыхлое. Га­метоциты этих видов плазмодиев появляются и ис­чезают из периферической крови вместе с трофозоитами. Гаметоциты P.falciparum имеют характерную полулунную форму с ядром, расположенным в средней части цитоплазмы (у женских форм оно небольшое и компактное, у мужских – крупное и рыхлое). Пигмент окружает ядро в виде коротких палочек. Стадия развития гаметоцитов P.falciparum в эритроците существенно превышает длительность шизогонии. Эти гаметоциты выявляются в перифе­рической крови на 8-10 день после появления кольцевид­ных трофозоитов, продолжая поступать в кровь через несколько недель после их исчезновения на фоне отсутствия клинических симптомов малярии..

Эритроциты, пораженные P. vivax и P. ovale, увеличиваются в диаметре до 10-12 мкм, хуже окрашиваются по Романовскому —Гимзе; эритроциты, пораженные P. ovale, могут приобретать неправильную форму, иметь бахромчатый край. Морфология эритроцитов, содер­жащих P. malariae и P. falciparum, не меняется.

В эритроцитах, содержащих P. vivax на различных стадиях раз­вития, выявляются множественные мелкие азурофильные зерна (зер­нистость Шюффнера), при наличии в эритроцитах P. ovale зерна редкие и крупные (зернистость Джеймса), при обнаружении в эритроцитах кольцевидных трофозоитов P.falciparum можно выявить не­большое количество крупных азурофильных зерен (зернистость Маурера), а в тех случаях, когда возбудителем является P. malariae, в эритроцитах выявляют мелкую зернистость Циманна.

Читать еще:  Лечение депрессии без лекарств

Морфология возбудителей малярии в толстой капле. Кольцевид­ные трофозоиты P. vivax, P. ovale, P. malariae обычно имеют оди­наковую величину, однако в толстой капле они часто дефор-

мируются, превращаясь в форму запятой или восклицательного знака; цитоплазма при этом концентрируется около ядра в виде округлого или треугольного комочка. Наряду с кольцевидными трофозоитами можно найти другие формы плазмодиев и определить вид воз­будителя.

Аналогичные превращения происходят и с кольцевидными трофо­зоитами P. falciparum, часть из которых сохраняет свою форму. Цитоплазма может разрываться, располага­ясь с двух сторон от ядра в виде «крыльев ласточки», нередко находят раздвоенные ядра. На других стадиях развития плазмодии малярии в периферической крови обычно не выявляются.

Для амебовидных трофозоитов P. vivax в толстой капле характерна деформация их цитоплазмы в виде двух или нескольких комочков, располагающихся около ядра.

Трофозоиты P. malariae в мазке выглядят как компакт­ные овальные или округлые образования с большим количеством пигмента.

На стадии морулы различные виды плазмодиев имеют разное количество мерозоитов и форму морулы. У P. malariae в толстой капле морула сохраняет форму розетки, шизонты и морулы P. ovale напоминают аналогичные формы P. malariae, однако ядро более крупное, пигмента меньше, встреча­ются неразрушенные пораженные эритроциты. При малярии, выз­ванной P. vivax, пораженные эритроциты так же не всегда раз­рушаются, сохраняется зернистость Шюффнера. У P. ovale, в отличие от P. vivax, ядра крупные, неправильной формы, отсутствуют крупные «разорванные» амебовидные трофозоиты, мерозоиты круп­ные и их меньше в моруле.

Женские гаметоциты (гамонты) P. vivax и P. malariae в толстой капле не удается отличить от взрослых трофозоитов. Мужские га­метоциты имеют крупное ядро, окруженное узким обод­ком бледно-голубой цитоплазмы с рассеянными по ней зернами пигмента. Гаметоциты P. falciparum имеют характерную полулун­ную форму.

Серологический метод – определение антител к плазмодиям малярии с помощью РИА или ИФА с диагностическими целями проводится редко.

Разновидности микроорганизмов, вызывающих протозойные инфекции

Медицинская теория определяет протозойные болезни как приобретенные патологии, возбудителями которых являются простейшие формы жизни. Одноклеточные паразиты попадают в тело человека через контакт с почвой, растениями, дикими и домашними животными, продуктами питания. Проникая в системы организма, паразитические формы жизни начинают делиться, формируя многочисленные колонии.

Передвигаются по зоне обитания при помощи жгутиков и ресничек, дополнительно раздражая слизистые оболочки.

Протозоа обитают в крови, лимфе, кожных тканях, полостях внутренних органов(в т.ч. половых). Жизнедеятельность описываемых созданий оказывает патогенное влияние на органы и ткани. Питаясь и размножаясь, патогенные простейшие отравляют человеческое тело, генерируют болезненные реакции и осложнения.

Осложнения после протозойных болезней

Невмешательство в ход протозойной инвазии и отказ от терапии создают предпосылки к формированию комплекса опасных для здоровья осложнений таких как:

  • Стремительная потеря веса;
  • Локализация воспалительных очагов в спинном и головном мозге;
  • Ухудшение функционального состояния костей и суставов;
  • Многочисленные патологии печени, почек, кишечника, поджелудочной железы;
  • Колиты;
  • Иридоциклит — воспаление радужной оболочки глаза;
  • Вымывание полезных веществ из-за приступов диареи.

Если протозойные заболевания проявились у ребенка в раннем возрасте, то невмешательство в прогресс патологии ведет к отставанию в физическом и интеллектуальном развитии.

Протозойные заболевания человека: разновидности

Вид и характер болезни зависят от типа паразита, поселившегося в организме. Распространено заражение такими видами простейших:

  • Корненожками: наиболее известный патогенный представитель — амеба;
  • Споровиками: малярийный плазмодий;
  • Инфузориями;
  • Жгутиконосцами.

В результате патогенного воздействия паразитов человек становится носителем таких болезней как амебиаз, малярия, токсоплазмоз, трихомоноз, лейшманиноз, трипаносомоз. Опишем распространенные патологии детально.

Амебиаз

Человек является единственным природным носителем паразита Entamoeba histolytica. Микроорганизм попадает в тело носителя через ротовую полость посредством приема внутрь зараженной воды или пищи. Заражению в большей мере подвержены мужчины 20-50 лет. Регистрируется несколько форм болезни:

  • Кишечный амебиаз;
  • Внекишечный амебиаз;
  • Кожный амебиаз.

Кишечный амебиаз

Наиболее распространена и изучена кишечная форма болезни. При кишечной локализации человек может быть носителем без дегенеративных последствий, либо может наступить прогрессирующее поражение толстой кишки.

В легкой форме болезнь проявляет себя чередующимися приступами диареи и запорами. Переход на более тяжелую стадию характеризуется общей слабостью, болями в животе, кровью в кале. Диагностическим маркером кишечного амебиаза является многократное превышение нормы концентрации эритроцитов при пониженном содержании лейкоцитов.

Кишечная форма провоцирует ряд осложнений:

  • Кишечные кровотечения;
  • Гнойный перитонит;
  • Выпадение геморроидальных узлов;
  • Перфорацию кишечных стенок;
  • Аппендицит.

Печеночный амебиаз

Симптоматика схожа с признаками острого вирусного гепатита: желтуха, увеличение печени в размерах. Могут отекать ноги, кожа становится рыхлой и сухой, а лицо бледнеет. Осложнения печеночного амебиаза способны привести к смерти больного.

Кожный амебиаз

Кожный амебиаз характеризуется образованием гнилостных язв в промежности и на ягодицах. Язвы имеют темные края, источают зловоние.

Диагностика патологии

Для идентификации недуга применяют лабораторные и инструментальные методы: анализы кала, мочи и крови (при заражении амебами отсутствует эозинофилия); рентген толстой кишки, компьютерная томография, радиоизотопное сканирование.

Лечение недуга

При терапии назначаются фармакологические противопротозойные средства: Дилоксанид, Метронидазол, Дегидроэметин, Флагил, Фурамид. Курс препаратов продолжается от 10 до 20 суток. Во время лечения показано соблюдение диеты: из рациона исключается жирная, острая, соленая и пряная пища. Показан прием вспомогательных средств — гепатопротекторов, пробиотиков, иммуностимуляторов.

Профилактика сводится к поддержанию чистоты в месте проживания, соблюдению личной гигиены и тщательной термической обработке пищи.

Сонная болезнь

Медицинское название — «африканский трипаносомоз». Паразиты-трипаносомы попадают в организм через слюну: чаще всего посредством укуса мухи цеце. Первая стадия болезни наступает проявляется через одну-три недели после укуса.

Чтобы началась инвазия, достаточно, чтобы в организм попало до 400 трипаносом. Зараженная муха способна за один укус «одарить» потенциального больного полумиллионом особей паразита. Заражение неизбежно.

Сонная болезнь начинается с формирования трипанидов на коже. Отекают конечности и лицо, веки. Изредка случаются приступы лихорадки с повышением температуры тела до сорока градусов; вздуваются лимфатические узлы; развивается иридоциклит. У больного появляется хроническая усталость, зараженного постоянно клонит в сон. Человек становится апатичным и заторможенным.

Дальнейшее течение сонной болезни характеризуется нарушениями нервной деятельности: речь становится нечеткой; появляется неконтролируемое дрожание языка, рук и ног; нарушается координация движений.

Диагностика и лечение африканского трипаносомоза

Для благополучного избавления от недуга терапию нужно начинать до того момента, как проявятся судорожная активность, дефекты координации и параличи.

В качестве диагностических мер применяются тест Романовского-Гимзе, реакция иммунофлуоресценции, иммуноферментный анализ; делается пункция пораженных лимфоузлов. Для подтверждениям диагноза возможен ввод крови больного лабораторным морским свинкам.

Читать еще:  Фенилкетонурия - генетические причины заболевания, симптомы, диагностика и лечение

Для лечения назначается фармакологический курс, включающий в себя Эфлорнитин, Сурамин и Меларсопрол. Без лечения человек умрет с вероятностью в 95%. Нужно обращаться к диагностике каждый раз при возращении из областей обитания мухи цеце, так фармакология не разработала иммуностимулирующих средств, направленных на купирование сонной болезни.

Малярия

Локализуется в организме человека из-за укусов комаров, инфицированных плазмодиями. Малярия — бесспорный лидер по числу летальных исходов среди инфекций. Малярия смертельно опасна для лиц со слабым иммунитетом.

Патология характеризуется тяжелым протеканием и устойчивостью к лекарственным препаратам. Стать носителем паразита можно, посетив тропическую местность или другие зоны обитания заразных комаров (страны Карибского бассейна, Юго-Восточная Азия, территория Среднего Востока).

  • Лихорадка;
  • Многочисленные аллергические реакции;
  • Потеря аппетита;
  • Обезвоживание;
  • Желтуха;
  • Рвота и диарея.

Маркеры заболевания проявляются после спустя 36-48 часов после попадания одноклеточного паразита в организм носителя. В тяжелых случаях дополнительно проявляется судорожная активность.

Клинически острая стадия малярии выражается в почечной недостаточности, разрушении эритроцитов крови, легочным отеком.

Для диагностики достаточно взять пробу крови и проверить ее на наличие плазмодиев. Больному показано стационарное лечение даже при малой концентрации простейших паразитов в пробе крови. Для ликвидации патогенных микроорганизмов больному прописывают лекарственные препараты на основе хлорохина. Если малярия «подхвачена» в районах Юго-Восточной Азии зараженному назначается комплекс из тетрациклина и хинина.

Тяжелым больным дополнительно назначают переливание эритроцитов; маннитол — для восстановления почечных функций; противосудорожные средства; также ставят капельницы для нормализации водно-солевого баланса.

Токсоплазмоз

Причина заражения — одноклеточный организм вида Toxoplasma gondii. Попадает в организм человека через не обработанную термически пищу или через кал домашних животных. Описываемая протозойная патология уникальна тем, что передается от беременной женщины плоду.

Для ребенка врожденный токсоплазмоз грозит отклонениями в развитии, трудностями при учебе и общении с окружающими. Малыш гарантировано будет заражен, если у матери имеется острый приобретенный токсоплазмоз. Приобретенная форма болезни характеризуется увеличением лимфатических узлов, повышением температуры, головной болью и слабостью.

На начальной стадии болезнь вполне можно спутать с вирусной инфекцией. Если наблюдается иммунодефицит, то возникают осложнения такие как пневмония или энцефалит, грозящие смертью носителю паразита.

Для диагностики недуга применяют:

  • Срез тканей;
  • Тест Сейбина-Фельдмана;
  • Тест на наличие IgM-антител;
  • Ввод зараженного биоматериала лабораторным мышам.

Наиболее трудной является терапия врожденной формы. Лечебный курс длится более 1 года. Ребенку назначают Пириметамин в комплексе с Сульфадиазином и Фолинатом кальция. Назначается курс глюкокортикостероидов для подавления воспалительных очагов.

Для того, чтобы не заразиться, нужно минимизировать число контактов с животными и подвергать пищу тщательной термообработке.

Криптоспоридиоз

Возбудителями являются кишечные протозоозы, криптоспоридии, попадающие в организм переносчика после контакта с домашним скотом. Болезнетворные организмы также могут быть проглочены с пищей или водой. Попадая в ЖКТ, паразиты нарушают процесс пищеварения. У носителя начинаются приступы рвоты и диареи, которые вымывают полезные вещества, нарушают баланс жидкости и минеральных солей.

Болезнетворные микробы поражают не только стенки кишечника, но и слизистые оболочки глотки, гортани, пищевода. Наиболее подвержены разрушению вследствие жизнедеятельности криптоспоридий стенки тонкого кишечника. В среднем проходит 10 дней до появления симптомов.

  • Жидкий стул;
  • Приступы рвоты и диареи;
  • Постоянная слабость;
  • Быстрое снижение массы тела.

У больных СПИД/ВИЧ заболевание хронизируется. Терапия длится до 1-го месяца. При лечении используется Метронидазол, Дараприм, Фуразолидон.

Любое заражение протозоа означает угрозу для жизни и здоровья. Иммунитет не в состоянии сам справиться с патогенной угрозой. Зараженный не только сам испытывает дискомфорт, но и сам является «ходячим очагом» инфекции, при каждом выдохе выбрасывая в воздух несколько сотен тысяч болезнетворных микробов.

Особенно тщательно нужно подходить к профилактике протозойных инфекций, если планируется поездка в другую климатическую зону и страну, где местная кухня кардинально отличается от привычного меню.

Диагностика протозойных инфекций

Не все простейшие (Protozoa), паразитирующие у человека, являются возбудителями заболеваний. Для обнаружения вида возбудителя и подтверждения клинического диагноза не обойтись без методов лабораторной диагностики. Простейшие, поселившиеся в организме человека, могут находиться в разных стадиях своего развития.

Классы паразитов и исследуемые биоматериалы

Подразделяются простейшие на 4 класса:

  • корненожки (Rhizopoda) – представлены у человека амёбами;
  • жгутиконосцы (flagellata) – основной патологический представитель – лейшмании;
  • ресничные (ciliata) инфузории – самый распространенный возбудитель болезни – балантидий;
  • споровики (sporozoa) – опасный паразит этой группы – малярийный плазмодий.

При инцистировании микроорганизм приобретает округлую форму и покрывается защитной оболочкой. В форме цисты простейшие становятся маловосприимчивыми к неблагоприятным факторам среды.

Локализация патогенных микроорганизмов может быть в разных органах и тканевых структурах. Поэтому выбор материала для исследования зависит от того, где может находиться паразит.

Исследованию могут подвергаться:

  • кровь;
  • костный мозг;
  • содержимое абсцессов (в печени, легких, мозге);
  • содержимое полостей (брюшной, плевральной, перикардиальной);
  • мокрота;
  • моча;
  • кал;
  • слизь и экссудаты кишечника, свищей.

Обратите внимание: разновидностей диагностики очень много, мы рассмотрим те виды, которые наиболее распространены в клинической лабораторной практике.

Частные виды диагностики

В каждом конкретном случае перед лаборантом ставится задача нахождения определенного возбудителя, иногда попутно с основным обнаруживаются и другие.

Диагностика корненожек (амёб)

Насчитывается 6 видов этого микроорганизма, способного к обитанию в кишечнике человека. Клиническое значение имеет только дизентерийная амёба, встречающаяся в вегетативной форме и в виде цист.

Основной путь обнаружения паразита – исследование в нативном (необработанном) биологическом препарате.

Дополнительно применяются иммунологические методы:

  • непрямой иммунофлюоресценции;
  • непрямой агглютинации (РНА);
  • радиальной иммунодиффузии.

Обратите внимание: серологические методы малоинформативны и применяются лишь как дополнение к основным в сомнительных случаях.

Диагностика ресничных (инфузорий)

Патогенная форма микроорганизмов этого рода – балантидий. Это микроб, вызывающий балантидиаз – болезнь, сопровождающуюся язвенным процессом толстого кишечника. Возбудитель обнаруживается в нативном мазке в виде вегетативной формы и цисты. Материал для мазка (кал и слизь) забирается при ректороманоскопическом исследовании и высевается на специальные среды.

Диагностика жгутиконосцев (лейшманий, лямблий, трипаносом, трихомонад)

Для человека представляют опасность лейшмании, трипаносомы, лямблии, трихомонады.

Лейшмании – микробы, вызывающие лейшманиоз, исследуются в мазках крови, материалах костного мозга, соскобов из кожных инфильтратов. В некоторых случаях при диагностике лейшманий применяется посев на питательные среды.

Трипаносомы – возбудители сонной болезни (американский/африканский трипаносомоз, или болезнь Шагаса).

Африканский вариант определяют в начальном периоде при исследовании периферической крови. Патологические микробы при прогрессировании болезни находятся в материале пункций лимфоузлов, в запущенных стадиях – в спинномозговой жидкости.

Читать еще:  Диета при псориазе - меню с рецептами. Диета и продукты при лечении псориаза

Возбудителя Американского трипаносомоза в острую фазу болезни можно найти в жгутиковой форме. В дальнейшем безжгутиковые паразиты находятся в мышечных клетках, миокарде, в нейронах центральной нервной системы.

Для диагностики трипаносом при подозрении на болезнь Шагаса исследуемый материал обследуется под микроскопом при малом увеличении. При этом мазки и толстую каплю предварительно окрашивают.

Лямблии, ведущие паразитический образ жизни в двенадцатиперстной кишке находят в желчи или в анализе кала (цисты).

Трихомонады (кишечная, ротовая, влагалищная) обнаруживаются при микроскопии материалов, взятых из пораженных слизистых оболочек.

Выявление споровиков (малярийного плазмодия, возбудителя кокцидоза и пр.)

Споровики – паразитические формы, обитающие в клетках, тканях и полостях организма.

Наиболее распространенный и опасный для человека вид – малярийный плазмодий, имеющий 4 основные разновидности возбудителя: возбудитель трехдневной малярии, четырехдневной малярии, тропической малярии и малярии овале.

Половое развитие плазмодия (спорогония) проходит в комарах Анофелес. Бесполое (тканевая и эритроцитарная шизогония) – в печеночной ткани и эритроцитах человека. Эти особенности жизненного цикла обязательно учитываются при диагностике малярийного плазмодия.

Так, у только что заболевшего больного в крови можно обнаружить половые клетки цикла спорогонии. А вот на высоте малярийных приступов в крови в большом количестве появляются шизонты.

Более того, в разные фазы малярийной лихорадки проявляются различные формы плазмодия:

  • в период озноба кровь наполняется мерозоитами, разновидностью шизонтов;
  • на высоте температуры в эритроцитах скапливаются кольцевидные трофозоиты;
  • снижение температуры характеризуется преобладанием амебовидных трофозоитов;
  • в периоды нормального состояния кровь содержит взрослые формы шизонтов.

Исследование возбудителя малярии (малярийного плазмодия) проводится в мазке и в толстой капле.

Морфологические формы паразитов для четкой дифференциации анализируются путем специфического окрашивания. Этот вариант «визуализации» позволяет разобрать индивидуальные морфологические особенности той или иной разновидности микроорганизма.

Обратите внимание: диагностика малярии при исследовании мазков и толстых капель крови иногда бывает ошибочной. Тромбоциты крови в некоторых случаях могут ошибочно быть причислены к малярийному возбудителю. Также иногда симулируют плазмодий фрагменты лейкоцитов и других клеток.

Основные методы исследования простейших

Кратко ознакомимся с самыми распространенными методами исследования на наличие простейших.

Диагностика простейших методом нативного мазка и мазка, окрашенного раствором Люголя (в кале)

Препарат готовится из эмульсии кала в изотоническом растворе. На предметное стекло наносятся две капли натрия хлора и рядом раствор Люголя. В оба состава деревянной палочкой добавляют исследуемый материал и после накрывания стеклом просматривают в разных разрешениях микроскопа.

По определенным признакам регистрируют найденных простейших. Для точности готовят 2-3 препарата из одного материала. В сомнительных случаях анализ повторяют несколько раз на протяжении 2-3-х недель.

Методом можно обнаружить вегетативные и цистные формы:

Вместе с патогенными формами определяются и непатогенные простейшие. Также у здоровых носителей находятся просветные и цистные формы.

Важно: исследования во избежание неточностей и ошибок следует проводить неоднократно.

Результат диагностики простейших методом нативного и окрашенного мазка должен содержать описание формы возбудителя (просветная, циста, тканевая).

Требования к исследованию:

  • забранный на анализ материал (жидкий кал) исследуется не позднее 30 минут после дефекации;
  • оформленный кал необходимо подвергнуть диагностике в течение 2 часов после дефекации;
  • в материале не должно быть примесей (дезинфицирующих средств, воды, мочи);
  • для работы с материалом используют только деревянные палочки, стеклянные не пригодны из-за соскальзывания слизи;
  • палочки после использования немедленно необходимо сжигать.

Метод консервации (исследование кала) при диагностике простейших

Исследование проводится путем фиксации простейших с консервантом. Отличие этого метода от предыдущего в том, что консерванты позволяют сохранить препарат в течение длительного периода.

Используемые консерванты:

  • Барроу. Содержит консервирующие ингредиенты: 0,7 мл хлорида натрия, 5 мл формалина, 12,5 мл 96% спирта, 2 г фенола и 100 мл дистиллированной воды. Красящий состав: 0,01% раствор тионина (азура).
  • Раствор Сафарлиева. Состав: 1,65 г сульфата цинка, 10 мл формалина, 2,5 г кристаллического фенола, 5 мл уксусной кислоты, 0,2 г метиленового синего, 100 мл воды. Этот консервант используется в случаях, когда материал должен храниться более месяца.

Консервантом наполняются пустые флаконы, в них переносят материал, в пропорциях 3:1, затем при необходимости добавляют краситель. Оценка результатов производится при исследовании 2-3-х препаратов.

Метод формалин-эфирного обогащения (анализ на наличие простейших в кале)

Этот способ диагностики позволяет отделить и сконцентрировать цисты простейших. Для анализа нужны следующие ингредиенты: формалин (10 мл), 0,85 г изотонического раствора, дистиллированная вода, серный эфир, раствор Люголя.

Смесь биоматериала с перечисленными жидкостями смешивают и центрифугируют. Полученный на дне пробирки осадок окрашивают раствором Люголя и исследуют на предмет наличия цист и вегетативных форм.

Метод нахождения лейшманий (мазок костного мозга)

Для диагностики лейшманиоза используются реактивы: смесь Никифорова (серный эфир и этиловый спирт), фосфатный буфер, Азур-эозин по Романовскому.

Вещество костного мозга очень осторожно помещают на предметное стекло после специальной подготовки. Используется микроскоп с иммерсионной системой.

В острый период болезни в пунктате обнаруживается большое количество лейшманий.

Обратите внимание: иногда кровяные клетки могут напоминать обработанные лейшмании, поэтому очень важно лаборанту быть внимательным и иметь достаточный опыт для самостоятельного исследования.

Метод обнаружения лейшманий в мазке из кожного инфильтрата

Необходимые реактивы аналогичны предыдущему анализу.

Исследуемый материал получают из имеющегося бугорка или язвенного содержимого. Соскоб при подозрении на лейшманиоз делается очень аккуратно скальпелем, без крови. Затем готовится препарат на стекле. Для точности получаемых результатов одновременно подвергают осмотру несколько препаратов.

При наличии заболевания среди присутствующих в исследуемом материале макрофагов, фибробластов, лимфоидных клеток определяются и лейшмании.

Метод выделения чистой культуры лейшманий, полученных путем соскоба патологических тканей

При этом способе диагностики простейших соскоб тканей помещают в специальную питательную среду, в которой происходит активное размножение лейшманий.

Перед забором соскоба кожу тщательно обрабатывают спиртом, затем делается надрез бугорка, со дна которого извлекается содержимое и помещается в пробирку со средой. Материал забирается несколько раз, после чего он помещается в разные пробирки. Затем в термостате при температуре 22-24 градуса происходит культивирование. Результаты оценивают под микроскопом. Этот метод применяется, когда другие, более дешевые и быстрые способы диагностики простейших неэффективны.

Увидеть, как на практике расшифровываются анализы на наличие простейших по капле крови, вы сможете, посмотрев видео-обзор:

Лотин Александр, медицинский обозреватель

10,908 просмотров всего, 1 просмотров сегодня

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector